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液相色譜儀串聯質譜的檢測流程方法總匯

點擊次數:2373 發布時間:2020/1/7 17:53:12

如今蛋白組/代謝組學被廣泛應用于生命科學領域,液相色譜儀串聯質譜技術(液質聯用)是蛋白組/代謝組學研究的主要手段,因此液質聯用受到了醫學科學的極大重視。那么今天就來了解一下液質聯用的基本流程吧!

 

液相色譜儀

 

液相色譜部分由進樣系統、輸液系統、分離系統三個部分組成

(1)進樣裝置要求密封性好,死體積小,重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。

(2)輸液系統最為主要的是梯度洗脫裝置——有兩種方式:一種稱低壓梯度,指常壓下溶劑按一定比例混合后再由高壓泵輸入色譜柱,又稱外梯度;另一種稱高壓梯度,指先用高壓泵將各溶劑輸入混合器混合,再送入色譜柱,也稱為內梯度。

(3)分離系統包括色譜柱、連接管和恒溫器等。與單純LC相比,LC-MS一般流速較低(高流速可能影響霧化效果),所以一般用窄徑柱,即2 mm或2.1mm的,粒徑一般為3.5μm,也有1.7μm的。

 

液相色譜儀

 

液相色譜儀分析的一般流程

(1)ESI電離:其工作原理是將液滴變成蒸汽,產生離子發射的過程中形成的溶劑由液相泵輸送到ESI Probe,經其內的不銹鋼毛細管流出,這時給毛細管加2-4 kv的高壓,由于高壓和霧化氣的作用,流動相從毛細管頂端流出時,會形成扇狀噴霧,使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠。ESI屬于最軟的電離方式,通常只產生分子離子峰。適合熱不穩定的極性分子,能分析小分子及大分子。

(2)四極桿質量分析器:四極桿內所包圍的空間存在雙曲線形電場。從離子源入射的加速離子穿過四極桿中的電場會受到電場作用,只有選定的m/z離子以限定的頻率穩定的通過四極桿質量分析器,其他離子則碰到極桿上被吸濾掉,不能通過,即達到“濾質”的作用。四極桿質量分析器結構緊湊,體積小,掃描速度快,適用于LC-MS聯用儀。

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