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從專業角度帶您了解液相色譜儀具體操作步驟

點擊次數:2426 發布時間:2020/1/14 16:11:09

 液相色譜儀是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。

 

液相色譜儀

 

液相色譜儀的主要操作步驟:

1、過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜。

 

2、對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

 

3、打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統。

 

4、進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。

 

5、有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10ml/min。

 

6、調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。

 

7、設計走樣方法。點擊file,選取selectusersandmethods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊newmethod。選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完后,點擊protocol。

一個完整的走樣方法需要包括:

a、進樣前的穩流,一般2-5分鐘;

b、基線歸零;

c、進樣閥的loading-inject轉換;

d、走樣時間,隨不同的樣品而不同。

 

8、進樣和進樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。

 

9、關機時,先關計算機,再關液相色譜。

 

10、填寫登記本,由負責人簽字。

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